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普通pcr和荧光定量pcr的区别

 发布时间:2022-09-22 点击量:426

PCR仪也被称做“基因扩增仪"是核酸检测、PCR实验、qpcr实验常用的仪器设备,根据 PCR实验方法主要分为以下几种:普通PCR仪、梯度PCR仪、 荧光定量PCR 、快速PCR仪、原位PCR仪等。

一、普通PCR仪

普通PCR是指在PCR 过程中指设定一个退火温度参数,进行样本的PCR扩增。

这种PCR仪往往属于单通道模式,单一的参数设定,会影响到实验效率,所以比较适宜用在检测量较小,实验任务量不大的小规模PCR扩增实验室。比如学校实验室,科研机构实验室,检测实验室等。

二、梯度PCR仪

梯度PCR采用多通道模式,是在同一台PCR 仪器中可以设置不同的温度梯度和退火温度进行扩增循环,从而可以快速筛选出较佳退火温度的通道单独进行扩增的PCR 仪,从而减少PCR实验中的循环次数节约PCR扩增时间,所以有的梯度PCR仪也被称为快速 PCR仪。梯度PCR仪多用于检疫检测、科研实验室、临床检测、生命科学实验室等机构。

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三、实时荧光定量PCR仪

荧光定量PCR不仅可以进行PCR扩增,还可以进行荧光信号采集并连接到计算机中进行荧光定量分析,它可以实时监测与 DNA结合的荧光染料激发状态。而普通PCR检测仪则是通过检测插入DNA中核酸 染料量来测定PCR最终产物量的荧光。但是荧光定量PCR不太适合扩增较长片段的对于,荧光定量PCR 仪比较适合扩增的DNA片段长度在100-300bp为宜。有的荧光定量PCR仪为提升检测效率,会采用双通道或多通道设计,这样可以实现同时测定不同荧光标记的样本,有效解决了 PCR 工作的重复性与复杂性。比如朗基系列Q2000系列实时荧光定量PCR仪,主要应用于临床检测、核酸检测、医药科技、科研等机。

 

四、原位PCR仪

这种PCR仪可以直接在取样的细胞或组织样本上进行基因扩增,仪器通过原位检测技术和扩增数据分析并可用于直接检测病原体,有效提高检出率,甚至可以观测到病原体在生物体内的分布规律。原位PCR仪往往具备光定量 PCR、普通PCR的特征,在病理研究和科研机构方面应用较多。

 

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