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流式细胞术(FCM)的优势及应用

 发布时间:2022-11-09 点击量:120

流式细胞术(FCM)是一种基于激光的技术,用于生物颗粒的多参数分析。随着技术的发展,FCM已进入许多使用领域。FCM也用于免疫表型研究。因此,它可以用于确定细胞亚群、谱系、细胞分化和激活阶段以及克隆性。随着FCM分析的发展,B细胞发育和分化的各个阶段已变得可识别。此外,FCM已经开始识别和表征几个不同B细胞亚群和相关诊所中的表达谱。

流式细胞术分析血小板功能有较多优势。它可以血小板直接在全血的生理环境中进行分析(包括红细胞和白细胞,两者都影响血小板活化)。样本的简化操作可防止人为的体外活化和血小板亚群的潜在损失。流式细胞术方法主要用于检测血小板表面膜的特异性激活依赖性修饰谱。此外,随着针对新功能表位的新单克隆抗体的开发,它们比较容易地并入分析中。全血流式细胞术可检测到仅有1%部分活化血小板的亚群,只需微量(~5µL)血液,使用流失细胞仪还可以准确分析严重血小板减少症者的血小板。如果抗体试剂可用,血小板的流式细胞术评估同样适用于动物研究。此外,非物种特异性的非抗体试剂(例如,自体配体[FITC纤维蛋白原]、钙指示剂、F-actin探针[phalloidin]、核苷酸染料[噻唑橙]、活性染料和膜联蛋白V)等也常用在动物研究中。



流式细胞术其实是一个平台,可在此平台上执行数十种非常不同、高度专业化的分析,并提供同时执行许多这些分析的能力。正是这种分析的多因素性质使FACS成为当今免疫生物学的常用工具。FACS分析得出的数据具有较高的信息密度,这对于阐明极其复杂的免疫系统是可行的。20世纪以来,FACS技术一直在快速发展。这一演变包括不断将应用程序注入临床环境——事实上,事实上,几乎每个现代医院都至少有一个这样的仪器,这一事实已经证明了FACS在诊断和预后方面的作用。目前基础研究实验室正在开发的化验,据推测将在未来十年成为医院环境中的常规化验。

流式细胞术有助于AML亚类化,而无复发性细胞遗传学异常。例如,根据WHO分类(FAB分类下的AML M0),根据定义,其通过细胞化学缺乏髓过氧化物酶反应性,依赖于FC建立髓系。在急性粒单核细胞白血病或急性单核细胞-单核细胞性白血病的偶发病例中,细胞化学显示非特异性酯酶活性很低,FC可以证实单核细胞分化。FC鉴定白血病髓母细胞上的巨核细胞相关抗原,如CD9、CD36、CD41和CD61,为诊断急性巨核细胞白血病(FAB分类下的AML M7)提供了重要支持,并有助于将其与AML M0区分开来。

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