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多克隆抗体和单克隆抗体之间的主要区别及应用

 发布时间:2022-11-21 点击量:237

什么是单克隆抗体
单克隆抗体定义:
与靶抗原上的特定表位结合的一种(单一)抗体构成单克隆抗体。
单克隆抗体生产
为了产生单克隆抗体,是将免疫原注射到宿主动物中。一旦免疫原引起免疫反应,脾脏中的 B 细胞就会被提取出来并与骨髓瘤细胞(癌细胞 B 细胞)融合。
健康的脾细胞不会在细胞培养中无限期地存活,因此进行此融合过程以制造永生细胞系。通过该过程产生杂交瘤细胞系。
通过将脾脏中的单个 B 细胞融合并培养到它们自己的杂交瘤中,产生了所有产生相同特异性抗体的 B 细胞的单一培养物。
B 细胞将单克隆抗体分泌到细胞培养基中。在这里,它们被提取出来进行进一步的测试和纯化。
单克隆抗体杂交瘤克隆的产生提供了稳定的可再生抗体来源,确保每批与前一批相同。
为了产生一种分泌富含抗体的液体(称为腹水)的肿瘤,也可以将杂交瘤注射到小鼠的腹腔中。
单克隆抗体的用途:

  • 检测特定抗原

  • 检测蛋白质家族的单个成员

  • 在实验/批次之间创建一致的结果

  • 对背景较少的细胞进行染色——非常适合免疫组织化学、免疫细胞化学和免疫荧光实验

  • 量化蛋白质表达(例如流式细胞术或荧光激活细胞分选)

  • 检测分子构象的变化

  • 检测磷酸化状态的变化

  • 检测 X 射线晶体学的目标

  • 创建缺少特定细胞类型的动物模型

  • 免疫疗法


单克隆抗体不适用于:

  • 基于同源性检测跨物种的靶蛋白

  • 检测低水平的目标蛋白

  • 检测构象改变的蛋白质


多克隆单克隆
具有不同抗原互补位的异质抗体群具有一个互补位的特异性抗体的同源群体
非表位特异性表位特异性
与相似抗原发生交叉反应的可能性增加低交叉反应性
背景噪音的可能性增加低背景噪音
批次变异性相同的批次
开发成本低开发成本高
快速生产(约 3 个月)生产缓慢(约 6 个月)
许多宿主物种选择很少有宿主物种选择

什么是多克隆抗体?
多克隆抗体定义:
与靶抗原上许多不同表位结合的许多(多)不同抗体构成多克隆抗体。
多克隆抗体生产
将免疫原注射到宿主动物体内以产生多克隆抗体。动物中的免疫反应是由这种免疫原激活多个 B 细胞引起的,所有这些 B 细胞都针对免疫原上的特定表位。
大量具有不同互补位的抗体由此产生,因此对靶蛋白的亲和力不同。
 免疫后,可以直接从血清(去除凝血蛋白和红细胞的血液)中使用这些多克隆抗体,或者将它们纯化以获得不含其他血清蛋白的溶液。
必须用抗原对新动物进行免疫以创建新批次,这意味着批次之间存在高度的可变性。
多克隆抗体的用途:

  • 检测具有高抗原同源性的已知或未知抗原亚型

  • 检测低水平的特定抗原

  • 尽可能多地捕获抗原(例如免疫沉淀或染色质免疫沉淀)

  • 检测变性蛋白质

  • 检测具有可能的遗传多态性、糖基化或构象变化的靶标

  • 跨多种检测类型检测天然蛋白质

  • 在不同 pH 值和盐浓度的溶液中检测目标


多克隆抗体不适用于以下领域:

  • 定量实验,例如流式细胞仪,由于多个结合位点导致信号放大,会导致不正确的结果

  • 与高同源蛋白存在交叉反应问题的情况

    苏州阿尔法生物提供的蛋白质试剂包括:阿尔法试剂、PCR检测试剂、抗体试剂、单克隆抗体、多克隆抗体、蛋白上样缓冲液、快速转膜液、考马斯亮蓝、PBS缓冲液、NC膜等。