细胞培养需要注意什么

细胞培养需要注意什么

细胞培养需要注意什么

细胞培养是细胞和分子生物学中使用的关键工具。它可以对细胞生理学和细胞生物化学进行建模。此外，细胞培养使研究人员能够确定药物和有毒化合物对细胞反应的影响。那么怎么培养出一批好的细胞呢？细胞培养需要注意什么？
细胞培养需要注意以下几点：
一、细胞培养环境
不同的细胞，培养环境是不同的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞，比如：内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，例如：巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度快，贴壁速度也快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以进行细胞培养的时候应该多探索该细胞喜欢的生长空间密度和生长规律等相关问题，才能培养出理想的细胞。
二、良好的细胞形态
对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：
1.倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）
2.把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。
3.如果一次效果还不理想，可重复多次，直到找到细胞合适的形态。这里需要注意的是要结合细胞的生长情况而定。
三、培养基的量
由于每种细胞的生长环境不同，对养料需求也是不相同的，这就需要我们取认真了解每种细胞系的特性，根据细胞生长需求及细胞特性来选择培养基类型和适宜的培养基添加剂。关于培养容器并不是小的玻璃方瓶12ml，大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点，细胞形态会长得更好。（可对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是需要注意及时补液、换液，避免细胞死亡。
四、细胞培养瓶的选择
在实验过程中你常常会发现发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性塑料瓶相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比塑料瓶内好。这可能是因为塑料瓶比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在塑料瓶这种相对“更安逸"的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。
所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，塑料瓶比玻璃瓶会好，对于生长速度快的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，塑料瓶会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。掌握了上面这些小技巧，就能培养出漂亮的细胞了。
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