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如何选购合适的PCR耗材

 发布时间:2023-02-02 点击量:195
如何选购合适的PCR耗材

PCR耗材包括PCR管(EP管)、8连排管、96孔PCR板、深孔板等这些材质一般为聚丙烯PP材质,具有高品质、高纯度、高透明的特点,一般都在洁净空间生产加工。

PCR耗材为什么一般都是PP材质的呢,为什么需要环境洁净?

因为PCR/qPCR耗材通常会与试剂或样品直接接触,而聚丙烯(PP)材质是生物学惰性材料,表面不易于粘附生物分子,且有着良好的化学耐性,及温度耐受性(可以121℃ 高压灭菌,也可以承受热循环过程中的温度变化)。

这里强调一下耗材质量(是否干净)的重要性。PCR耗材必须保证没有污染物和抑制剂。高压和辐射能够去除细菌和DNA酶,但不能去除灰尘和DNA残留,它们可能会抑制PCR反应或产生非特异性扩增。物质是具有吸光度的,即便是很小的污染物也会吸收反应体系中的荧光,影响荧光信号的采集。因此,在生产这些塑料耗材时,从制模到最终的包装都必须在具有颗粒数量限制的设施环境中进行。

高热传递性

1)极薄的壁厚优化热传递减少循环时间。

之前买的PCR板/管材质厚度不一,是不是厚点的稳定性更好呢?

不是的,管壁厚度会直接影响热传导率,极薄的壁厚可优化热传递减少循环时间。要想提升PCR反应效率,保证反应稳定高效进行,需要选择均一、超壁薄的PCR耗材。

高反射荧光信号

1)qPCR更推荐使用优质的白色PCR耗材。

2)管盖:高透光性,盖子的光通过率直接关系着仪器的信号采集,选择一款透光性高的盖子对荧光定量检测极其重要。

不同颜色的PCR管/板,该怎么选呢?

对于普通的PCR反应选用透明或者彩色的PCR管都是可以的,而彩色透明的PCR管更有助于进行样品分类管理。但qPCR更推荐选用优质的白色PCR耗材。由于qPCR需要实时定量检测荧光信号强度,更需要灵敏、精确的荧光信号传递。实验证明,与传统的透明PCR产品相比,白色PCR产品可大程度地反射荧光信号,减少孔间信号交叉污染,可优化实时荧光定量PCR的结果。

高防污染性

1)盖子要紧密,盖子与管子的适配性要好,可以减少交叉污染。

2)PCR板要具有升孔缘,有利于密封。

3)一端有手持条,联排盖一端要有突出的手持端,开盖减少污染。

为什么有的PCR板孔是凸出的,有的却是平的呢,哪个更好?

适合的才是好的。常见的PCR板有平孔缘和加高孔缘两种。

平孔缘的反应板,可适用于大多数的PCR仪。

升孔缘的反应板,便于封膜,可降低样品间的交叉污染风险。

高辨识性度

1)具有数字字母标识,有助于识别单个孔及样品位置。2)具有切角,便于辨认方向。

对于96孔或者384孔板,为什么切角和标识都不是很相同呢?

这是由切角和标识的作用决定的。

切角:PCR板的切角位置选择取决于适配仪器要求,便于定位。

标识:PCR板的数字字母标记有助于识别单个孔及样品位置。一般为凸出的颜色数字标识或者印刻标识。对于一些自动化应用实验,印刻标记的反应板密封性会更好。

体积精确

1)密封性:紧密的盖子,或者其他方式比如封膜减少蒸发。

不同体积的PCR管/板,该怎么选呢?

选择宗旨:依据具体的实验要求选用合适的产品。PCR管的体积大多数都可以满足PCR反应的要求。在此基础上,推荐优先选用低容管。因为低容反应管/板有着较小的上方空间,可提高热传导率并降低蒸发。同时,在加样时需要避免加样过量或过少。过量会导致热传导率下降,溢出及交叉污染,而过少可能会造成样品蒸发损失。

常见反应管的规格及体积:

单管/8联管/12联管:0.5mL,0.2mL,0.15mL,0.1mL

96孔板:0.2mL,0.15mL,0.1mL

384孔板:0.04mL

易操作性

PCR耗材操作起来简单易行,如:盖子好盖但不影响密封性等。PCR耗材要与PCR仪器适配性好。

对于96孔或者384孔板,为什么有的有裙边,有的没有呢?

其实PCR/qPCR板的裙边是为了更好地适应自动化应用,可为仪器提供稳定的支持和机械耐受强度,且移液过程中的稳定性也会更高。PCR板一般分为无裙边、半裙边、全裙边。

无裙边板:可适用于大多数的PCR仪或qPCR仪,但不适用于自动化应用。移液过程中稳定性不高,需要配合板托使用。半裙边板:可适配标签或应用条码,及自动化应用,且有着较好的移液稳定性。全裙边板:非常适用于自动化实验应用,也可适配标签及应用条码。机械强度较好,可适用于凸出模块的PCR仪,且移液过程中稳定性高。

PCR封板膜有好多种类型,哪种实验效果更好呢?

根据具体的PCR实验要求选用适配的高质量封板膜,不仅能有效地保护样品,防止污染,还可以提供可信赖的实验检测数据。

提供温度耐受性和密封性强、高透明度、操作简便的高质量PCR/qPCR膜。

     苏州阿尔法生物提供的PCR耗材包括:0.2mlPCR管、PCR8联排管、八排管、96孔PCR板、酶标板、封板膜等,同时提供荧光定量PCR仪、凝胶成像仪、电泳仪等实验室仪器设备等。