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实验室常用的20种限制性内切酶

 更新时间:2024-04-25 点击量:125

在分子生物学领域,限制性内切酶(Restriction Endonucleases)是一类重要的酶,能够识别特定的DNA序列并在其特定位置切割双链DNA,从而产生特定的DNA片段。这些酶被广泛应用于DNA重组、基因克隆、PCR等实验中。以下是20种常用的限制性内切酶及其相关应用介绍,以及在实验中需要注意的事项。

限制性内切酶 AscI

 1. EcoRI

序列识别:GAATTC

应用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA连接实验中。

注意事项:适宜的反应缓冲液和适当的温度对反应效果至关重要。

 

 2. HindIII

序列识别:AAGCTT

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:应注意避免酶的过度消耗和不必要的环境污染。

 

 3. BamHI

序列识别:GGATCC

应用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA连接实验中。

注意事项:反应条件的优化对保证酶的活性和特异性至关重要。

 

 4. XhoI

序列识别:CTCGAG

应用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA连接实验中。

注意事项:应避免酶与RNA的结合,以免影响实验结果。

 

 5. EcoRV

序列识别:GATATC

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:在反应中应严格控制酶的浓度,避免过度消耗。

 

 6. SalI

序列识别:GTCGAC

应用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA连接实验中。

注意事项:酶的保存和使用条件对保持其活性至关重要。

 

 7. XbaI

序列识别:TCTAGA

应用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA连接实验中。

注意事项:应避免酶的不必要冻融和长时间存放。

 

 8. PstI

序列识别:CTGCAG

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:应选择适宜的反应缓冲液,以确保酶的最佳活性。

 

 9. SmaI

序列识别:CCCGGG

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:酶的反应条件需要在酶活性和DNA完整性之间取得平衡。

快速内切酶-agei内切酶EG23501-6

 10. NotI

序列识别:GCGGCCGC

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:应避免酶与DNA的过度反应,以免影响DNA片段的完整性。

 

 11. KpnI

序列识别:GGTACC

应用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA连接实验中。

注意事项:反应体系中的离子浓度和pH值对酶的活性有重要影响,应予以严格控制。

 

 12. SacI

序列识别:GAGCTC

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:反应温度和时间的选择对酶的活性和特异性至关重要。

 

 13. SphI

序列识别:GCATGC

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:应避免酶与反应体系中的其他成分发生不必要的相互作用。

 

 14. EcoRII

序列识别:CCWGG

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:酶的保存和稀释应避免超过其最佳活性浓度。

 

 15. BglII

序列识别:AGATCT

应用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA连接实验中。

注意事项:反应体系中的酶和DNA的比例应适当控制,以避免浪费和不必要的反应。

 

 16. AvaI

序列识别:CYCGRG

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:反应体系中的离子浓度和温度需要仔细控制,以确保酶的最佳活性。

 

 17. NdeI

序列识别:CATATG

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:酶的保存和冻融条件对其活性和稳定性至关重要。

快速内切酶-agei内切酶

 18. SstI

序列识别:GAGCTC

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:应选择适宜的反应缓冲液和反应温度,以保证酶的活性和特异性。

 

 19. BstEII

序列识别:GGTNACC

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:反应时间和酶的浓度需要进行优化,以获得最佳的实验结果。

 

 20. HpaI

序列识别:GTTAAC

应用:常用于DNA片段的切割和DNA重组实验中。

注意事项:酶的稳定性受到环境条件的影响,应在适宜的温度下保存和使用。

限制性内切酶在分子生物学实验中很常用,其特异性识别和切割DNA序列的能力使其成为DNA重组、基因克隆和PCR等实验的关键工具。然而,在使用限制性内切酶时,也需要注意一些重要事项,如优化反应条件、严格控制酶的浓度、避免酶的过度消耗和不必要的环境污染等,以确保实验能够顺利进行并获得可靠的结果。更多实验室仪器,实验耗材,科研试剂请进入苏州阿尔法生物进行咨询