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CHO细胞转瓶后长势不好原因分析及解决方案

 更新时间:2024-06-05 点击量:105

在生物制药领域,CHO(中国仓鼠卵巢)细胞是常用的宿主细胞,用于生产重组蛋白药物。然而,在CHO细胞的培养过程中,有时会遇到细胞转瓶后长势不佳的问题。这种情况可能会影响药物的生产效率和产品质量。本文将分析可能导致 CHO细胞转瓶后长势不佳的原因,并提出相应的解决方案。

CHO细胞转瓶后长势不好的原因主要有以下几点:

1.环境变化:细胞在转瓶过程中,可能会遇到温度、湿度、氧气和二氧化碳浓度等环境因素的变化。这些变化可能会对细胞的生长状态产生影响。例如,温度的波动可能导致细胞代谢途径的改变,湿度的变化可能会影响细胞的渗透压平衡,氧气和二氧化碳浓度的波动可能会影响细胞的呼吸和酸碱平衡。因此,维持稳定的培养环境对于细胞的生长比较重要。

2.营养物质供应不足:转瓶后,细胞可能会面临营养物质供应不足的问题。尤其是葡萄糖、氨基酸和维生素等关键营养素的缺乏,可能会导致细胞能量供应不足,影响细胞的生长和代谢。因此,在转瓶后,需要及时补充足够的营养物质,以满足细胞的生长需求。

3.代谢废物积累:细胞代谢产生的废物,如乳酸和氨,如果在转瓶后不能及时清除,可能会对细胞生长产生不利影响。这些废物积累过多会导致细胞内环境恶化,影响细胞的生长和生产力。因此,定期更换培养基,及时清除代谢废物,可以使细胞维持良好的生长状态。

4.细胞密度和竞争:转瓶后,细胞密度可能会增加,导致细胞间的竞争加剧。过高的细胞密度可能会导致营养物质的消耗过快,代谢废物的积累增多,以及细胞间的接触抑制现象。这些因素都会影响细胞的生长和生产力。因此,在转瓶前,需要控制细胞的密度,避免过高的细胞密度对生长产生不利影响。

5.无菌条件:转瓶过程中的无菌操作不当可能会导致细胞污染。细胞污染会严重影响细胞的生长状态,甚至导致细胞死亡。因此,在转瓶过程中,需要严格遵守无菌操作规程,包括对培养器具的消毒、操作人员的无菌操作技术等,以防止细胞污染的发生。

细胞培养瓶

转瓶后细胞长势弱的优化解决方案:

1. 优化培养环境:确保转瓶后的培养环境(如温度、湿度、氧气和二氧化碳浓度)与原培养环境一致,减少环境变化对细胞的影响。

2. 调整培养基配方:根据细胞的营养需求,调整培养基中的营养成分,确保细胞在转瓶后能够获得充足的营养供应。

3. 定期更换培养基:定期更换培养基,以清除代谢废物,保持培养环境的稳定。

4. 控制细胞密度:在转瓶前,控制细胞的密度,避免过高的细胞密度对生长产生不利影响。

5. 加强无菌操作:在转瓶过程中,严格遵守无菌操作规程,防止细胞污染。

   此外,可以使用一些商业化的添加剂和设备来促进CHO细胞的生长,如使用InstiGROInstiSHAKEInstiTHAW促细胞生长剂。

- InstiGRO:这是一种促进CHOHEK单细胞生长的添加剂,可以提高克隆效率,加速手动铺板后细胞的生长。与Solentim VIPS系统结合使用,可以实现自动单细胞铺板,从而提高细胞株开发的效率。

- InstiSHAKE:这是一种专为CHOHEK细胞设计的振荡培养补充剂,可以提高细胞活力,加速细胞生长,有助于生产更高密度的培养物,并在一系列培养基中提供批次间的一致性。

- InstiTHAW:这是一种用于冷冻保存细胞的添加剂,旨在保护CHOHEK细胞在冷冻和解冻过程中的活力,确保细胞在冷冻保存后获得理想的恢复率。

CHO细胞在转瓶后出现生长不良时,可以通过优化培养环境、调整培养基配方、定期更换培养基、控制细胞密度、加强无菌操作以及使用商业化添加剂和设备等方法来解决问题。通过这些措施,可以有效地改善CHO细胞的生长状态,提高药物生产的效率和产品质量。

苏州阿尔法生物16年专注实验室仪器设备、生物试剂、实验耗材的供应商。所提供的细胞系开发设备主要包括:单细胞测序仪、纳米粒度仪、单细胞铺板验证仪,活细胞成像仪,  iPSC基质胶,细胞生长因子等。