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利用Solentim STUDIUS细胞成像分析仪评估细胞IgG产率的操作方法

 更新时间:2024-06-11 点击量:102

  摘要:本实验方法旨在介绍如何使用Solentim STUDIUS细胞成像分析仪进行细胞IgG 产率评估。本方法详细描述了从铺板到生长过程中的产率分析、排名和选择的全过程,以及STUDIUS在细胞系开发中的应用价值。

关键词:Solentim STUDIUS细胞成像分析仪,细胞IgG产率,实验方法

在生物制药领域,细胞培养技术已成为生产重组蛋白类药物的关键步骤。其中,细胞IgG产率的评估对于优化生产过程和提高产量具有重要意义。Solentim STUDIUS细胞分析仪作为一种数字化时代的实验室仪器,它具备样本追踪、自动分类、即时分类、避免人为错误和自动创建单克隆性报告等功能,为细胞IgG产率评估提供了高效、准确的解决方案。

使用Solentim STUDIUS细胞分析仪进行细胞IgG产率评估的详细实验方法步骤如下:

一、实验准备

1. 实验材料:细胞培养板、细胞悬液、IgG检测试剂盒。

2. 实验仪器:Solentim STUDIUS细胞分析仪、细胞培养箱、离心机、酶标仪。

3. 细胞培养板的准备:选择适合细胞生长的细胞培养板,并根据实验需求进行灭菌处理。

4. 细胞悬液的准备:从细胞库中取出目标细胞株,进行复苏和扩增,调整细胞密度至所需的接种密度。

3. IgG检测试剂盒的准备:根据试剂盒说明书,准备所需的试剂和标准品。

4. Solentim STUDIUS细胞分析仪的准备:开启仪器,进行系统自检和校准。

单细胞铺板设备

二、细胞铺板

1. 将准备好的细胞悬液按照预定的接种密度铺板到细胞培养板中,每孔加入适量的细胞悬液。

2. 轻轻摇动培养板,使细胞均匀分布。为保证细胞铺板均匀,可以使用Solentim VIPS进行全自动铺板验证。

3. 将细胞培养板放入细胞培养箱中,根据细胞生长需求设定适宜的培养条件(如温度、湿度、CO2浓度等)。

三、细胞培养与成像分析

1. 在细胞培养过程中,根据实验设计的时间点,使用Solentim STUDIUS细胞分析仪对细胞进行成像分析。

2. 在成像分析前,根据仪器操作手册进行参数设置,包括成像区域、曝光时间、分辨率等。

3. 将细胞培养板放入STUDIUS仪器中,启动成像分析程序。

4. 仪器将自动对每个孔进行成像,并记录细胞的形态、生长状态等数据。

5. 成像分析完成后,仪器将生成彩色节点,代表细胞生长过程中的关键时间点,实现数据跟踪和审计追踪。


单克隆细胞筛选


四、IgG产量检测

1. 根据IgG检测试剂盒说明书,收集细胞培养上清液。

2. 将上清液进行适当稀释,以便于酶标仪检测。

3. 使用酶标仪,根据试剂盒提供的检测方法,对上清液中的IgG含量进行定量检测。

4. 记录检测结果,包括吸光度值、IgG浓度等。

五、数据处理与分析

1. STUDIUS成像分析结果与IgG产量检测结果进行关联,建立细胞形态、生长状态与IgG产率之间的关系。

2. 利用STUDIUS的数据分析功能,对细胞克隆进行排名和选择,筛选出高IgG产率的细胞克隆。

3. 分析数据,生成报告,为后续实验和生产过程提供参考。

六、实验结束

1. 关闭Solentim STUDIUS细胞分析仪,进行日常维护和清洁。

2. 处理实验产生的废物,如废弃的细胞培养板、试剂等。

3. 记录实验过程中的关键参数和结果,整理实验数据。

通过以上详细实验方法步骤,使用Solentim STUDIUS细胞分析仪进行细胞IgG产率评估,可以实现从铺板到生长过程中的产率分析、排名和选择的全过程,提高实验的准确性和效率。

七、实验结果与分析

1. 产率分析结果:STUDIUS细胞分析仪可实时追踪细胞生长过程,通过彩色节点记录关键时间点的数据。通过对细胞形态、生长速度等参数的分析,可初步评估细胞IgG产率。

2. IgG产量检测结果:酶标仪检测结果显示,不同细胞克隆的IgG产量存在较大的差异。将检测结果与STUDIUS成像分析结果进行关联,可进一步优化细胞克隆的选择。

3. 数据处理与分析结果:利用STUDIUS的数据分析功能,对细胞克隆进行排名和筛选。结合IgG产量检测结果,筛选出高IgG产率的细胞克隆,为后续生产过程提供优质种子。

八、讨论与总结

本实验方法使用Solentim STUDIUS细胞分析仪进行细胞IgG产率评估,实现了从铺板到生长过程中的产率分析、排名和选择的全过程。STUDIUS具备的数据跟踪、审计追踪和多级密码保护用户访问等功能,为细胞系开发提供了可靠工具。实验结果表明,STUDIUS在细胞IgG产率评估方面具有较高的准确性和效率。

在使用STUDIUS进行细胞IgG产率评估的过程中,应注意以下几点:

1. 细胞铺板密度:根据细胞类型和生长特性,选择适当的铺板密度,以保证细胞正常生长和产率评估的准确性。

2. 成像分析时间点:根据细胞生长速度和产率变化,合理设置成像分析时间点,以捕捉关键时期的细胞状态。

3. 数据关联与分析:将STUDIUS成像分析结果与IgG产量检测结果进行关联,综合评估细胞IgG产率。利用STUDIUS的数据分析功能,优化细胞克隆的选择。

使用Solentim STUDIUS细胞成像分析仪进行细胞IgG产率评估的方法,为生物制药领域提供了高效、准确的实验手段。通过对细胞克隆的产率分析、排名和选择,有助于提高重组蛋白类药物的生产效率和质量。

苏州阿尔法生物提供的STUDIUS通过整合来自VIPS PRO单细胞铺板、Cell Metric®单克隆验证和克隆生长监测以及ICON™的IgG产率评估,帮助科学家能够更快、更自信地做出决策。该软件平台根据用户定义的参数自动、即时地分析数据,缩短了克隆的排名和选择所需的时间。