欢迎进入苏州阿尔法生物实验器材有限公司!
技术文章
首页 > 技术文章 > 生物反应器培养HEK293细胞的步骤与方法

生物反应器培养HEK293细胞的步骤与方法

 更新时间:2024-09-23 点击量:86

人类胚胎肾细胞(HEK293)是一种广泛应用于生物医学研究的重要细胞系,尤其在重组蛋白表达、病毒包装等领域具有显著优势。生物反应器作为一种模拟体内环境的体外培养系统,为HEK293细胞的规模化培养提供了有力支持。本文将详细介绍生物反应器培养HEK293细胞的步骤与方法。

二、生物反应器培养HEK293细胞的步骤

1. 准备工作

1)生物反应器选择:根据实验需求,选择适合的生物反应器,如搅拌式生物反应器、气升式生物反应器等。

2)培养基配制:选用适宜的HEK293细胞培养基,如DMEMMEM等,添加适量的血清、抗生素等成分。

3)细胞准备:将HEK293细胞从冻存管中复苏,传代至足够的数量,确保细胞活力在90%以上。

2. 种子细胞接种

1)将生物反应器内胆清洗干净,用70%酒精消毒,再用无菌水冲洗干净。

2)将配制好的培养基加入生物反应器内胆,确保无气泡。

3)将准备好的HEK293细胞悬液接种至生物反应器,接种密度一般为2×10^6/mL

3. 生物反应器运行

1)设置生物反应器参数:包括温度(37℃)、pH7.2-7.4)、溶氧(30-50%)、搅拌速度(根据生物反应器型号和细胞需求调整)等。

2)实时监测:通过生物反应器的在线监测系统,实时观察细胞生长状况、溶氧、pH等参数,并根据实际情况调整。

3)补料:根据细胞生长情况,定期补充新鲜培养基,以维持细胞生长所需的营养和环境。

4. 细胞收获

1)当细胞密度达到预期值(一般为1-2×10^7/mL)时,停止搅拌,将细胞悬液从生物反应器中取出。

2)使用离心机将细胞沉淀,去除上清液。

3)根据实验需求,对细胞进行冻存或进一步处理。

三、生物反应器培养HEK293细胞的方法

1. 无血清培养法

无血清培养法是指在培养基中不添加血清,而是使用替代物如血小板裂解物、血清替代物等。这种方法有利于提高重组蛋白的纯度和安全性。

2. 微载体培养法

微载体培养法是将细胞固定在微载体上,实现高密度培养。这种方法有利于提高细胞生长密度,降低生产成本。

3. 气升式生物反应器培养法

气升式生物反应器通过气体上升带动液体循环,实现细胞均匀生长。这种方法具有较好的氧气传递效率和剪切力小等优点。

4. 流加培养法

流加培养法是在生物反应器运行过程中,根据细胞生长需求,不断补充新鲜培养基。这种方法有利于维持细胞生长环境的稳定,提高细胞密度。

四、总结

生物反应器培养HEK293细胞是实现细胞规模化生产的关键技术。通过掌握生物反应器培养HEK293细胞的步骤和方法,可以为生物医学研究和生物制药产业提供有力支持。在实际操作过程中,应根据实验需求和细胞特性,选择合适的培养方法,以实现高效、稳定的细胞培养。

  苏州阿尔法生物作为楚怡发酵罐制造联盟的可靠供应商,致力于为客户提供各类高品质的微生物发酵罐和细胞生物反应器。我们的产品线包括玻璃生物反应器、一次性生物反应器、细胞贴壁培养生物反应器台式光照植物细胞发酵罐以及不锈钢发酵罐等中小型设备,这些设备在细胞扩增、疫苗生产、药物研发、生物合成和发酵工程等多个领域发挥着关键作用。

    此外,公司特别提供定制服务,能够根据客户需求设计和制造200L以上的发酵罐及相关设备。在华东地区,我们已拥有超过530位用户,行业满意度高达96.5%

    另外,我们还提供多种常用的细胞株,包括CHO细胞、MDCK细胞、HEK293细胞和基因编辑细胞等,以满足客户多样化的实验和研究需求。 想要深入了解细胞培养生物反应器中的代谢物积累如何影响细胞生长,EKF乳酸分析仪使用方法或者获取更多关于生物反应器的详细信息,请访问苏州阿尔法生物实验器材有限公司的网站