​ 质粒 DNA 少量快速提取实验方案

一、材料、设备及试剂（一）材料含pBS的E.coliDH5α或JM系列菌株，1.5ml塑料离心管(又称eppendorf管)，离心管架。（二）设备微量取液器(20μl,200μl,1000μl)，台式高速离心机，恒温振荡摇床，高压蒸汽消毒器(灭菌锅)，涡旋振荡器，电泳仪，琼脂糖平板电泳装置和恒温水浴锅等。（三）试剂LB液体培养基(Luria-Bertani)：称取蛋白胨(Tryptone)10g，酵母提取物(Yeastextract)5g，NaCl10g，溶于800ml去离子...

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载体质粒的基本定义和特性

一、载体与质粒的基本定义载体（Vector）指通过重组DNA技术，将有用的目的DNA片段送入受体细胞进行繁殖和表达的工具，细菌质粒是其中常用类型。质粒（Plasmid）的基本特征结构：染色体外的双链、闭环DNA分子，大小1-200kb，以超螺旋状态存在于宿主细胞。存在范围：主要存在于细菌、放线菌和真菌细胞中。功能：具有自主复制和转录能力，能在子代细胞中保持恒定拷贝数并表达遗传信息。宿主依赖：复制和转录需依赖宿主细胞的酶和蛋白质，离开宿主无法存活；但宿主无质粒也可正常存活。天然...

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荧光定量PCR仪的工作原理与检测技术解析

荧光定量PCR仪是一种基于聚合酶链式反应（PCR）和实时荧光检测技术的分子生物学工具，它能够精确测量DNA或RNA的浓度变化。以下是关于其工作原理与检测技术的详细解析：荧光定量PCR仪工作原理:1.PCR扩增过程高温变性：将双链DNA解旋为单链状态，以便后续引物结合。低温退火：引物与模板DNA互补配对，形成稳定的杂交体。适温延伸：在Taq酶的作用下，以引物为基础合成新的DNA片段。2.荧光信号实时监测染料法（如SYBRGreenI）：嵌入到双链DNA中的荧光染料会发出荧光，随...

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荧光定量PCR仪结果稳定的因素及保障措施

荧光定量PCR仪结果稳定的因素及保障措施：1.结构设计与制造工艺的优化抗干扰的机械构造：采用减震材料和精密加工工艺打造的机身框架，有效隔绝外部环境中的振动源。稳定的物理平台减少了光学元件位移带来的信号漂移，确保长时间运行下的基线平稳性。模块化组件布局：关键部件（如光源、检测器）采用模块化设计，便于维护更换且相互独立工作。这种隔离式架构防止局部故障扩散至整个系统，增强了整体稳定性。2.荧光定量PCR仪严格的校准体系与质控标准三维校准机制：定期对仪器进行硬件性能校准（包括温度、时...

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尿液STD多靶标检测（含PCR2/11/15及HPV14通道）该选哪款荧光定量PCR仪？

尿液样本的STD（性传播疾病）检测主要涵盖PCR2、PCR11、PCR15以及PCR15+HPV14通道的检测需求，这对荧光定量PCR仪的性能参数和适配性提出了多重挑战——既要应对尿液基质复杂的背景干扰，又要实现HPV14型分型与衣原体、支原体等多病原体的同步检测，同时需满足合规性与批量检测需求。针对这一应用场景，客户常常存在以下疑惑：我们的核心检测场景是尿液样本，这类样本基质相对复杂，可能存在背景干扰，同时需要兼顾多靶标的同步检测—比如HPV14型的分型（需区分不同高危/低...

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