什么是蛋白酶K，蛋白酶K的生产有哪些挑战？

蛋白酶K(ProteinaseK)是一种广谱丝氨酸蛋白酶,蛋白酶K于1974年在fungusEngyodontiumalbum的提取物中发现。能合成该种蛋白酶的微生物能在以角蛋白(Keratin)作为碳源和氮源的环境中生长，说明该酶可以消化角蛋白，因此被称为“蛋白酶K”。蛋白酶K由一条肽链组成，含有277个氨基酸，该蛋白的相对分子量~28.9kDa，蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联体(Asp39-...

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荧光蛋白Marker优化方案

荧光蛋白Marker优化方案有报道称一种自预染荧光蛋白Marker，能够实现蛋白Marker即是预染蛋白又是曝光蛋白。具体原理是：将天然提取的荧光蛋白（包括藻红蛋白、藻蓝蛋白、别藻蓝蛋白、绿色荧光蛋白、黄色荧光蛋白和红色荧光蛋白等，其分子量为20-300kDa），与能够结合抗体IgG的proteinA、proteinG和能被二抗结合的抗体Fc区蛋白或肽共价偶联，由于荧光蛋白自带颜色，从而实现蛋白即是预染蛋白，又是荧光蛋白的目的，无需转膜染色或X光片成像，此外，荧光蛋白Mark...

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mRNA疫苗生产流程及具体步骤

mRNA疫苗生产流程及具体步骤Step1：将含病毒的核酸序列的质粒，注入到大肠杆菌中，这里的质粒可以是从病毒中提取，但更安全有效的方法是根据发表的核酸序列优化设计直接连接到质粒上，避免跟病毒直接接触；Step2：在温暖适宜的条件下，大量繁殖生长携带了质粒的大肠杆菌；Step3：将上述生长繁殖的大肠杆菌转移至体积更大的营养液里，适宜条件下存放发酵，使其复制亿万级别的质粒；Step4：发酵结束后，加入酶或者其他化学物质分解大肠杆菌细胞壁，收集并纯化质粒；Step5：检测上述的质粒...

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初代测序技术分类及原理

1977年Sanger和Gilbert分别提出双脱氧链终止法和化学降解法测序法，标志着初代测序技术的诞生。初代测序技术分类Maxam-Gilbert化学降解法测序1.测序原理：先对DNA片段的5'或3'端进行放射性标记，再采用特异性化学试剂修饰和裂解特定的碱基位点，从而得到一系列有共同放射起点但长度不一的DNA片段混合物，通过对此混合物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳即可从放射自显影片直接读出DNA碱基序列。2.碱基序列的识读：聚丙烯酰胺凝胶电泳可以将DNA片段混合物按片段大小分开，片...

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常见生物样本的存储和运输条件汇总

常见生物样本的存储和运输条件汇总生物样本是医学研究的重要资源，其质量在很大程度上决定着临床结果的准确性和可靠性。目前生物样本及其提取产物主要有深低温和常温两大类保存方式，针对不同科研的需求，更多的样本保存方式也相继问世，本文将对常用的样本保存方式及运输条件进行小结，可以收藏保存备用。样本储存条件1.-196℃、-150℃深低温冻存超低温冻存是理想的样本保存方法，目前液氮（-196℃）是靠谱的样本保存方法，然而由于样本浸没在液氮中，游离的组织碎片可能带来交叉污染的潜在风险，因此...

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