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胎牛血清选购的冷知识

 发布时间:2022-04-12 点击量:153

   胎牛血清 (FBS) 是来自胎牛的凝结血液的液体部分,不含细胞、纤维蛋白和凝血因子,但含有大量对细胞生长至关重要的营养和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS 的主要成分。FBS 中的生长因子对于培养细胞的维持和生长至关重要。FBS 还含有多种小分子,如氨基酸、糖、脂质和激素。

      FBS 应用广泛。FBS 的主要用途之一是在真核细胞培养中,其浓度高达 20% 甚至更高,它提供许多促进细胞存活和增殖的必需营养素和生长因子。然而,需要注意的是,人类细胞培养物中的 FBS  可能会引入研究成果。用人类血清培养的人类细胞与用 FBS 培养的细胞表现不同。FBS 还用于人类和兽用疫苗以及生物技术药物的研究、制造和控制,并用于阻止胰蛋白酶消化 或用作冷冻保存中的保护剂。

胎牛血清

为什么使用胎儿血清而不是新生儿血清或成人血清?

      胎儿血清含有较多的生长因子,丙种球蛋白(即抗体)含量较低,非胎儿血清也有。这些很重要,因为生长因子促进细胞存活和增殖,而抗体可以与培养的细胞结合。此外,与成人或新生儿相比,胎儿血清中的补体蛋白(补体)含量较低。这些补体具有溶解培养细胞和干扰免疫测定的不良作用。

血清和血浆有什么区别?

       血清和血浆均来自全血,通过离心去除包括红细胞在内的成分。血浆和血清之间的区别在于,凝血蛋白存在于血浆中,但已从血清中去除。血浆一般是通过在离心前向血液中加入抗凝剂来制备的,但不会去除凝血蛋白。通过在离心前使血液凝固或通过广泛/渐进离心来制备血清。因此,与凝血相关的纤维蛋白原和蛋白质不存在于血清中。

       在人类中,以下 22 种蛋白质占血清和血浆总蛋白质含量的 99%:白蛋白、总 IgG、转铁蛋白、纤维蛋白原、总 IgA 、α-2-巨球蛋白、总 IgM、α-1-抗胰蛋白酶、C3 补体、结合球蛋白、α-1-酸性糖蛋白、载脂蛋白-B 、载脂蛋白-A1、脂蛋白 (a)、因子 H、铜蓝蛋白、C4 补体、补体因子 B 、前白蛋白、C9  补体、C1q 补体和 C8 补体。剩下的 1% 包括数百种蛋白质。血清蛋白白蛋白,浓度为 50 mg/ml ,约占总蛋白质量的一半。

胎牛血清的检验标准是什么?

       国际血清工业协会 ISIA是血清供应贸易组织,制定了质量控制标准化指南。这些指南要求使用特定方法进行以下测试,并且测试结果必须作为分析证书提供。

测试

细菌和真菌 - 无菌测试

支原体

细胞病变剂 - 病毒检测

血液吸附剂 - 病毒检测

牛病毒性腹泻 - 病毒检测

pH 测量

渗透压

总蛋白, 双缩脲法测定

内毒素

血红蛋白

电泳图

性能测试,例如干细胞培养

径向免疫扩散

免疫球蛋白

γ-谷氨酰转移酶 (GGT)

内毒素检测

内毒素,也称为脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),来自革兰氏阴性菌的外膜,有助于多种致病性革兰氏阴性菌的临床表现。在体内 ,内毒素会引起发烧和炎症反应,而在细胞培养中它们会引起细胞反应的变化。

内毒素水平通过鲎变形细胞裂解物 (LAL) 测试或较新的合成测试(称为重组因子测定)进行测量。变形细胞类似于脊椎动物中的白细胞,LAL 是由鲎 (美洲鲎;图 1)的血液制备的。LAL 对内毒素非常敏感,即使存在微量的内毒素也会凝结。许多鲎种群处于危险之中,因此应注意保护它们免受 消 失。

鲎

图 1.美洲鲎

不含外泌体或其他成分的 FBS

常规 FBS 含有大量细胞外囊泡,其中一些是外泌体。使用培养细胞进行外泌体研究时,使用不含外泌体的 FBS 至关重要。然而,重要的是要意识到,去除外泌体的 FBS  可能会以不同于常规 FBS 的方式影响和支持细胞生长。去除外泌体的 FBS 可以可以通过超速离心或超滤制备.

苏州阿尔法生物13年专注于生物实验室仪器及生物试剂耗材的供应,阿尔法试剂主要包括:胎牛血清,新生牛血清,培养基,抗体,天根质粒小提试剂盒,基因组提取试剂盒,纯化试剂盒,一抗、二抗等。