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购买细胞常见问题汇总

 发布时间:2023-02-16 点击量:366
购买细胞常见问题汇总

购买细胞收到细胞前,应做哪些准备工作?
     购买细胞应具有一定细胞培养知识与经验,并具备基本实验设备,如细胞培养实验室、超净工作台、CO2培养箱,倒置显微镜等;还应准备好相应的细胞无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板、移液管等。
购买的细胞收到细胞后,应该怎么操作?
1. 观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请及时与技术支持联系;
2. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于细胞培养箱内静置培养,隔天再取出进行观察;
3. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等;
4. 可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞传代时,可以将该培养基按照一定比例和自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件;
5. 确认细胞状态良好后,应及时将细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失;
6. 建议收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5张细胞照片,记录细胞状态,便于和厂家技术支持沟通交流。
细胞发货标准是什么?
   细胞发货时,保证细胞处于生长对数期;贴壁细胞达到75%以上汇合度,约5×10^5cells/T25细胞培养瓶;传代次数5代以内;冻存细胞发2个冻存管;无微生物污染。
 
细胞一般是以什么形式运输?
细胞通常用T25细胞培养瓶培养,发货时用相应的培养基灌满细胞瓶,密封瓶口后放在包装盒内,以快递的方式发送给客户。天气变冷,温度低于4℃时,以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
 
细胞培养过程中,是否可以更换培养基?
不建议替换。每株细胞均有其特定使用且已适应的培养基,而且经过一定时间驯化后,若骤然改变培养条件,细胞有可能出现不适应,表现出生长缓慢、颗粒增多、死细胞出现,造成细胞无法存活;也有些细胞在更换培养基后也能正常的生长,细胞状态也能维持,但问题会出现在冻存后期的复苏过程,有可能细胞没法复苏,所以不建议随便更换培养基。
 
购买细胞后如何选择细胞培养瓶?
一般,生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,那么采用塑料瓶会比玻璃瓶的效果好;生长速度快的细胞,用玻璃瓶培养的效果会更好。因此,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候(比如细胞刚复苏时或者原代培养),塑料瓶会好一点;而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
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