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HEK293细胞的特点与应用

 更新时间:2023-02-21 点击量:742

HEK293细胞的特点和应用

人胚肾 293 (HEK 293) 细胞是生物技术和研究中常用的细胞系之一。由于 HEK 293 细胞具有较高的生长效率,通常生成用于生物医学和药物研究的外源性蛋白质。HEK 293细胞 也会被用于各种转染实验中。
HEK 293 细胞起源和背景
人胚肾293细胞
    Alex Van der Eb 在 1970 年代时培养出了 HEK 293 细胞系。为了产生永生化细胞系,Graham 将 5 型腺病毒的 DNA 转染到 HEK 细胞的人类 19 号染色体中。Ad5 整合到细胞基因组中导致细胞凋亡的预防,从而导致细胞系的连续产生。在获得成功之前,Frank Graham 进行了 293 次实验,因此得名 HEK 293。
HEK 293细胞特点
HEK 293 细胞的直径通常在 11-15µm 左右,一般情况下,单层贴壁培养的HEK293细胞形态扁平,直径较大。HEK 293 细胞属于亚3倍体人细胞系。它们携带 64 条染色体、三个 X 染色体拷贝以及 4 kbp Ad5 掺入 HEK 293 基因组的 19 号染色体,表明细胞遗传学不稳定。
HEK 293细胞培养环境要求
HEK 293 细胞属于稳定细胞系,细胞培养要求也相对较低。这些细胞生长迅速,一般倍增时间概在34~36H。HEK 293 细胞既可以贴壁培养也可以悬浮培养,但多数情况下,这类细胞采用贴壁的方式进行单层培养。
    为了保持 HEK 293 细胞存活,通常实验高葡萄糖细胞培养基。正常情况下,应在大约 2-3 天内更换。HEK 293 细胞需要设置在 37°C 的加湿培养箱才能生长。培养箱还应补充 5% 的 CO2。
     在储存 HEK 293 细胞时,它们必须处于液氮气相。避免将细胞储存在 -80°C,因为从长远来看它们会失去活力。冷冻细胞时,必须缓慢进行。冷冻培养基必须包括完整的生长培养基。请记住用 5% 的冷冻保护剂(如二甲基亚砜)补充生长培养基。可以使用异丙醇储存箱以确保 HEK 293 细胞在将细胞移入液氮气相之前以每分钟 -1°C 的速度缓慢冷冻。
    解冻 HEK 293 细胞时,必须快速完成——在 37°C 水浴中轻轻搅动两分钟。细胞解冻后,必须将它们添加到预热的培养基中。以低速离心解冻的细胞以分离冷冻培养基并重新悬浮在生长培养基中。由于细胞中存在腺病毒,HEK 293 的生物安全等级为 BSL-2。
HEK293细胞
使用 HEK 293细胞的优势和局限性
使用 HEK 293 细胞,就像任何其他细胞系一样,各有利弊。下面列出了这些单元格的优点和局限性:
HEK 293 细胞优势
1.具有一致的结果和细胞具有高度可重复性 
2.可以高效地大量生产重组蛋白,使其成为新药开发的主流贡献者。
3.可用于稳定和瞬时基因表达
4.HEK 293 细胞对转染有明显的反应,并且可以在转染中使用不同的化学和物理方法。
HEK 293 细胞的局限性
1.容易被细菌、支原体污染,可以使用支原体清除试剂盒进行消灭。
2.易受病毒污染
3.培养时间延长会导致细胞健康状况下降

HEK 293 细胞应用
HEK 293 细胞用于广泛的研究应用。以下是使用 HEK 293 细胞系的一些研究领域:
1.受体信号
HEK 293 细胞常用于离子通道和细胞膜受体的异源表达。许多研究人员使用这些细胞来研究通常与疾病有关的 G 蛋白偶联受体信号通路。这些细胞还用于表征各种生物体中的嗅觉受体。
2.蛋白质生产
如前所述,HEK 293 细胞在大量产生重组蛋白方面异常高效。为此,科学家们一直在广泛使用该细胞系功能性蛋白质。
3.癌症研究
HEK 293 细胞具有致瘤性,常用于癌症研究。在一项研究中,HEK 293 细胞被用来解释二甲双胍在癌症中的作用。研究证实,二甲双胍有助于阻碍细胞迁移和抑制趋化因子白介素 8 的表达。
HEK 293 细胞也经常在涉及测试对癌症特异性细胞分析效果的研究中用作对照。近期,这些细胞被用于研究百里醌对乳腺癌影响的研究中。
HEK 293 细胞开发
 HEK 293T 是 HEK 293 细胞系的一种变体,这种细胞衍生物携带 SV40 大 T 抗原,使这些细胞能够在含有 SV40 启动子的质粒载体中产生重组蛋白。话虽如此,HEK 293T 广泛用于病毒颗粒生产。HEK 293 细胞系具有其特性,因此在生物技术和研究中得到广泛应用也就不足为奇了。
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