SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳原理：
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基硫酸钠）， SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在达到饱和的状态下，每克多肽可与1.4g去污剂结合。
当分子量在15KD到200KD之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW为分子量，X为迁移率，k、b均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳常用试剂及设备
试剂：蛋白值样品，SDS-PAGE loading buffer，PBS，Tris-Hcl (PH 8.8)， Tris-Hcl (PH 6.8) ，30%丙烯酰胺，10%SDS，10%过硫酸，5×SDS-PAGE电泳缓冲液，考马斯亮蓝R-250染色液，脱色液、天能预制胶。
仪器耗材：垂直电泳槽，电泳仪，电泳仪电源，移液枪，移液枪tip吸头，离心管、试剂瓶。
实验步骤
一、凝胶配置
1．分离胶的配制
（1）找出配套的胶板，用擦镜纸擦干净，并固定在配胶器上。随后用去离子水试漏；
（2）若胶板不漏水，就进行分离胶的配制。依次将水、30%丙烯酰胺、1.5M Tris-Hcl（PH 8.8）、10%SDS、10%过硫酸铵加到干净的小烧杯中，混匀（1mm的胶板，一般配一块胶用5ml。所配的胶浓度一般为12%，但浓度也要视情况而定。蛋白越小，胶的浓度越大）；
（3）将胶板中的水倒掉，并用滤纸吸干水分（不要将滤纸塞到胶板底部）；
（4）小烧杯中再加入TEMED，混匀。（TEMED可使胶凝固，所以最后加）；
（5）灌胶：混匀的分离胶沿着胶板边缘轻轻灌下，防止产生气泡；
（6）用水将分离胶压平（用水灌满，同时加水时要缓慢加入，防止把胶吹起）。
也可以直接使用预制胶，预制胶直接拆开即用，不用配制。
2．浓缩胶的配制
（1）待分离胶与水中间形成明显的横线，即分离胶凝固。随后进行浓缩胶的配制，依次将水、30%丙烯酰胺、1.0M Tris-Hcl（PH 6.8）、10%SDS、10%过硫酸铵加到干净的小烧杯中；
（2）将分离胶上层的水倒掉，并用滤纸吸干水分（尽量不要把滤纸插入）；
（3）小烧杯中再加入TEMED，混匀；
（4）灌胶。然后插入梳子；
（5）把制胶器倒过来，胶仍然不会往外流，或可以明显看出梳子中两个齿之间的胶面明显凹下去，说明浓缩胶凝固。将凝固的胶板装入电泳槽内，并在电泳槽内加入SDS-PAGE电泳缓冲液，把胶浸泡一段时间，时间越长越好（防止梳子与胶相连，或胶因湿度不够而缩减）；
（6）点样时，再把梳子拔出来，拔时动作要轻，防止胶齿被拔断。
二、SDS-PAGE电泳步骤
1、调胶：拔掉SDS胶上的梳子，并用小针调整齿的位置（使它们都平行）。
2、点样：用20µL的小枪头，吸煮过的样品10µL，对准胶孔点样，注意不要把样品点在外面。使用适当的分子量蛋白marker。
3、电泳：电泳仪正负极接好，打开电源。浓缩胶：电压 low 100V，分离胶：电压 high 150V。
4、卸胶：等胶内的所有的蓝色都跑出去，电泳停止，一般时间为1-2小时左右。把胶板从电泳仪上卸下，用刀片把胶板撬开，胶的浓缩胶部分割除；
5、染色：放入考马斯亮蓝R-250染色液中进行常温过夜染色；
5、脱色：将过夜染色的SDS-PAGE胶放入脱色液中进行脱色，直到背景发白。
苏州阿尔法生物是一家集生命科学仪器设备、实验耗材和实验试剂供应于一身的专业公司。阿尔法生物产品覆盖生命科学研究、生物制药、环境监测、食品安全等领域，包括的实验室仪器设备有生物显微镜、细胞培养系统、蛋白电泳系统、数字PCR仪、高通量分析仪、高速冷冻离心机、超速离心机、台式高速离心机、低速离心机、落地式离心机、迷你离心机、真空浓缩仪、恒温恒湿培养箱、生物反应器、细菌培养箱研磨仪等，实验耗材常用的nest培养瓶、rainin移液枪tip头、离心管、PCR管、8联排管、三角摇瓶、培养皿等，实验试剂包括天根试剂盒、质粒抽提试剂盒、蛋白抗体、碧云天试剂、阿拉丁试剂、肿瘤细胞株、基因编辑细胞、支原体清除试剂盒等。阿尔法生物一直与国际生命科学仪器厂商以及一些新兴科技公司保持着深度的合作关系，这也为产品供应和技术支持提供了有力保障。 作为十四年年专注于实验室仪器设备、实验耗材和实验试剂供应商，无论是实验室的常规使用，还是科研人员的前沿探索，阿尔法生物都能够为您提供良好的软硬件支持和快捷、周到的服务。
