干细胞培养基的制备和使用是干细胞培养成功的关键，但在实际操作中需要注意多个细节以确保细胞活性、稳定性和实验可重复性。
1.严格遵循配方
根据干细胞类型选择专用培养基配方，不可随意替换成分或调整比例（如生长因子浓度、血清批号）。
例：多能干细胞依赖bFGF和LIF维持未分化状态，神经干细胞需要EGF/FGF-2组合。
2.无菌操作
全程在超净工作台内操作，避免微生物污染（尤其血清、添加剂易滋生细菌）。
分装后的培养基需抽样检测无菌性（如细菌培养试验）。
3.现配现用原则
生长因子和活性成分需现配现用，避免反复冻融失效。
长期储存需冷冻，使用时快速解冻并一次性用完。
4.过滤除菌
使用滤膜正压过滤，避免高压灭菌（高温会破坏生长因子和蛋白质成分）。
5.保存条件
短期保存：4℃冷藏（≤1周），避免反复开盖污染。
长期储存：分装后-20℃~-80℃冷冻，标注名称、浓度和日期。
干细胞培养基关键注意事项：
1.无菌操作
全程在超净工作台内完成，避免微生物污染（尤其血清和添加剂易滋生细菌）。
分装后培养基可抽样检测无菌性（如细菌培养试验）。
2.成分稳定性
生长因子、β-ME等活性成分需现配现用，避免反复冻融。
长期储存需冷冻，使用时快速解冻并一次性用完。
3.批次一致性
不同批次的血清或基础培养基可能存在差异，需通过预实验验证稳定性。
建议使用同一批号血清，并记录详细信息（如供应商、生产日期）。
更新时间：2025-05-26
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