DNA 提取实验中的常见问题解析

分子生物中RNA和DNA提取会常常遇到一些问题，下面小编就RNA和DNA提取实验中的通常遇到的几个问题进行解析。1.提取产量低如果您遇到的DNA/RNA产量低于您对样品的预期，则需要考虑许多因素。通常，这是一个裂解问题。未裂解是产量低的主要原因。它也可能是由不正确的绑定条件引起的。确保使用新鲜的优质乙醇（100%200标准）稀释缓冲液或添加到结合的步骤。劣质乙醇或旧库存可能已经吸收了水分，并且浓度不正确。如果洗涤缓冲液制备不正确，您可能正在洗掉提取的DNA或RNA。2.提取低...

查看更多

生物实验室操作技术规范

病原微生物实验操作规范病原微生物接种的操作规范：做到以下4点能较大限度地减少接种时气溶胶的产生。1.打开菌种管时，将安瓿管颈部烧热，用冷的湿棉球使之突然破裂，才可以大大减小溶胶的产生。2.划板时，琼脂平板要选用表面光滑的；接种环应用弹性小的金属丝制作，丝杆要短，环不宜过大，划板动作要轻。3.接完种后，蘸有菌液的接种环应在含有消毒液的毛巾上吸干后再放到火焰上灼烧到红。4.混匀微生物悬液的时候，旋转式摇动，不能左右摇动；摇动时动作轻柔不要使悬液弄湿试管塞。生物样本移液操作规范生物...

查看更多

生命科学研究中常用的几种实验方法

生命科学研究时生物学的分支，下面介绍几个关于生命科学常用的几种实验方法：一、BCA法测蛋白质浓度实验原理：BCA(bicinchoninicacid，二辛可酸)法测定蛋白质即在碱性条件下蛋白质与Cu2+络合，并将其还原成Cu1+。Cu1+和BCA试剂反应使其由原来的苹果绿形成稳定的紫蓝色复合物，在562nm有强烈的光吸收，且吸光值和蛋白质浓度在广泛范围内有良好的线性关系，因此可用于蛋白质浓度测定。二、免疫组化原理:免疫组织化学，即免疫组化，是应用免疫学基本原理一-抗原抗体反应...

查看更多

实时荧光定量 PCR技术

实时荧光定量PCR，简称RT-QPCR,属于Q-PCR的一种，目前该技术已得到广泛应用，如：扩增特异性分析、基因定量分析、基因分型、SNP分析等。荧光定量PCR常用的方法是DNA结合染料SYBRGreenⅠ的非特异性方法和Taqman水解探针的特异性方法。SYBRGreenI是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的荧光染料，可与所有的各种序列的双链DNA分子结合。在游离状态下，SYBRGreenI发出微弱的荧光，但一旦与双链DNA结合，嵌入至dsDNA，荧...

查看更多

如何选择合适的细胞凋亡试剂盒

细胞调亡是细胞主动死亡的过程，并出现一系列特征变化。包括核固缩、核碎裂、凋亡小体形成，以及DNA特征性片段化、新的基因表达和特定的生物大分子合成等。流式细胞仪可以对不同细胞凋亡的过程进行定性和定量检测，通过检测细胞膜完整性来反应细胞凋亡是常用的流式检测细胞凋亡常用方法之一。其原理是：①用AnnexinV检测早期凋亡细胞：AnnexinV可以结合细胞膜上的磷酯酰丝氨酸，磷酯酰丝氨酸位于正常细胞膜内侧，不会被检测到，凋亡时外翻到细胞膜外表面，可以被检测到。②用PI或者7AAD检测...

查看更多