悬浮细胞电穿孔转染法的实验流程详解

[实验原理]当细胞置于非常高的电场中，细胞膜就变得具有通透性，能让外界的分子扩散进细胞内，这一现象称为电穿孔。运用这一技术，许多物质，包括DNA、RNA、蛋白质、药物、抗体和荧光探针都能载入细胞。作为一种基因转导方法，电穿孔已被广泛用于各种细胞类型，包括细菌、酵母、植物和动物细胞；而且，它还能作为注射方法（称为电注射），把各种外源物质引入活细胞。与其他常用的导入外源物质的方法相比，电穿孔具有很多优点。一.不必象显微镜那样使用玻璃针，不需要技术培训和昂贵的设备，可以一次对成百万...

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内毒素去除方法有哪些

内毒素去除方法概述内毒素是存在于革兰氏阴性细菌外膜中的致病因子，具有较好的耐热性和稳定性，对人体健康有着不可忽视的危害。本文将概述内毒素的成分和特性，并讨论了目前常见的内毒素去除方法包括超滤去除法、活性炭法、表面活性剂萃取、强酸强碱、层析法等。同时还分析了各种方法的优缺点以及在工业生产中的应用前景。一、超滤去除法和活性炭法内毒素由多糖O抗原、核心多糖和类脂A等组成，作为细菌外膜的主要结构成分，不易被化学药品破坏。为了有效去除内毒素，可以采用多种方法。超滤去除法通过使用孔径适当...

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细胞转染方法之-磷酸钙沉淀法

【实验原理】磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法。磷酸钙有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮作用进入靶细胞，被转染的DNA可以在细胞内进行瞬时表达，也可整合到靶细胞的染色体上从而产生不同基因型和表型的稳定克隆。该方法可广泛用于转染许多不同类型的细胞。细胞转染试剂【仪器、材料和试剂】（一）仪器、用具CO2培养箱[1]、10cm细胞培养平板、巴斯德吸管、微量移液器[2]、15ml锥形管、烧杯、量筒...

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CRISPR/Cas9在微藻研究领域的研究和应用

CRISPR/Cas（ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats/CRISPR-associatedprotein）系统是当前先进的基因编辑技术之一。该技术因其高效、精确和相对容易操作的特点，在生物医学、农业、生物技术等领域获得了广泛的应用。CRISPR/Cas系统主要包含两个部分：一个能够识别目标DNA序列的导向RNA（gRNA）和一个能够切割DNA的Cas蛋白。通过设计特定的gRNA来引导Cas蛋白到特定的DN...

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从干细胞到心肌细胞：革命性悬浮培养技术的崛起

随着干细胞技术的发展，将干细胞转化为心肌细胞，并将其用于修复受损的心脏组织。近期，一项悬浮培养技术的突破为这一目标带来了新的希望。本文将介绍这一革命性技术的原理、应用和生物医学研究的潜在影响。hPSC干细胞悬浮培养技术的原理：传统上，将人类胚胎干细胞（hPSC）转化为心肌细胞（CM）是一个复杂的过程，需要精密的生物技术知识和复杂的培养条件。然而，最新的研究表明，一种名为悬浮培养技术的方法正在改变这一局面。这项技术利用简单的旋转烧瓶平台，使广泛的用户能够在不需要过多生物技术知识...

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